洁净室设计和微生物控制材料转移的基础

在洁净室环境中，微生物控制至关重要。受污染的环境可能导致产品召回，监管观察，罚款甚至消费者死亡。为了正确地预防，破坏和监视洁净室中的微生物污染，必须了解洁净室微生物学的几个方面，定期使用浮游菌采样器对洁净室检测。洁净室微生物学的基础介绍讨论了其中一些方面。之前我们有文章介绍了洁净室微生物学，讨论了指导文件和FDA的观察结果，并概述了洁净室中常见的微生物污染源。本部分将讨论洁净室设计中的一些基本概念，以及适当材料转移的一些注意事项。

洁净室设计基础

设计合理的设施有助于控制微生物污染。关于洁净室设计，有多个法规指导文件，包括EU附件1和FDA 21 CFR 211.42。附件1讨论了通过在运行状态下具有适当的环境清洁度来*大程度地减少颗粒和微生物污染。

FDA 21 CFR 211.42解决了设计和构造特征。根据规定：

• 设施必须具有合适的大小，构造和位置，以便可以正确执行清洁，维护和操作。

• 设施必须具有足够的空间和流量设计，以防止混淆和交叉污染。 表面必须易于清洁。 温度和湿度必须适当控制。 空气必须为正压且已过滤HEPA。 必须监视环境条件。 房间和设备必须正确清洁和消毒。 设备必须保持无菌状态。

• 通常建立从*脏的区域（不受控制的环境）到*干净的区域（A级环境）的洁净室设计。随着房间分类的增加，对长袍，清洁，监控和材料转移的要求也随之增加。房间的分类将取决于在该区域中设计的过程。例如，甲级房间通常用于无菌和高风险操作。B级房通常是A级房的背景房。 A / B级区域中的人员必须穿着完整的无菌工作服。C级和D级房间用于不太重要的操作。C级病房通常用于配制无菌产品或填充*终灭菌产品。D级房通常用于配制*终灭菌产品或制造清洗设备。1房间分类的规格在相关的指导文件中列出。欧盟的附件1提供了AD级的规范，而ISO 14464-1提供了洁净室和相关受控环境的ISO规范。

通过采用阶梯式设计，污染物可以留在较低分类区域或被清除，这有助于保持较高分类区域的清洁度并*大程度地减少微生物污染。这通常是通过物料转移程序，更衣室，通过区域，支持室，受控通道区域和正气压级联来实现的。区域的访问控制有助于防止未经适当培训的员工进入受控环境。此外，通过使用逐步分级设计，也可以建立人员，物料，废物和产品的逻辑和顺序流程。

A级区域设计为*清洁的区域。它们所泵入的HEPA过滤空气比周围区域多，并且用于高风险操作，例如无菌灌装。 HEPA过滤空气的较高交换率有助于减少无菌操作过程中微生物污染的可能性。通常，HEPA过滤器在天花板上，空气向下层叠，提供*层空气或干净空气。然后，空气进入回风管道并离开洁净室,通过专业的气体流形检测仪来判断设计是否合理,通过高效过滤器检漏判断过滤效果。

洁净室区域中存在的人和物体会在气流中产生湍流。地板被认为是房间*脏的部分。步行的人可能会搅动已经沉淀在地板上的微生物。在清洁区域中工作时，务必要缓慢而有意识地移动，避免对同事大喊大叫，并且切勿通过超过无菌生产所需的物体而破坏空气。

控制微生物污染*成功的方法之一是通过隔离器或限制进入屏障系统（RABS）将人员从流程中撤离的工程。虽然RABS和隔离器的内部都为无菌生产提供了符合标准的A级环境，但隔离器为产品提供了*大的保护。隔离器是完全封闭的，内部可以在制造前进行净化。隔离器的背景环境可以降级，而RABS仍需要在B级环境中操作，且操作员应配备完善的设备。

不仅是法规要求的环境控制，而且它们对于产品安全也起着重要的作用。就洁净室微生物而言，需要进行温度控制以为材料和重要仪器提供稳定的条件，并为人员带来舒适感。必须进行湿度控制，以防止微生物扩散，消除静电并再次提供舒适的工作环境。如果操作员感到不舒服（例如，太热或暴露于太多的湿度），则他们可能会出汗。人员穿工作服出汗会损害工作服的完整性，并将微生物引入生产环境。

正确的物料转移

材料和人员转移计划的主要目标是防止微生物污染进入洁净室。要求人员遵循既定的手术服程序和卫生要求进入洁净室。1卫生不当会导致皮肤细胞脱落和洁净室中的微生物污染增加。需要与管理人员进行公开坦诚的沟通，并且应报告任何疾病，开放性伤口或受损的皮肤层，例如晒伤或新鲜纹身。

人员和材料进入洁净室的流动必须遵循既定程序和专用路径。通常，建立并利用单独的专用路径来防止交叉污染。人员可以将物料登台通过区域并移至单独的礼服入口点。穿着工作服时，应根据经过验证的消毒剂（或紫外线，如果使用的话）的接触时间对材料表面进行消毒,并定期对洁净室检测。

关键是要充分控制转移到分类清洁区域的材料，以防止污染物涌入。进行正确的物料转移有许多注意事项，包括以下几点：

• 如果可能，应尽量减少微粒和微生物的产生。

  • 例如，纸板和木托盘可以脱落并将模具引入设施。这些类型的物品不得进入洁净室。

• 被转移的材料必须与所使用的消毒剂或转移方法兼容。

  • 例如，不应使用双面高压釜转移购买的介质板，因为介质板将被破坏。

• 应避免将物品放在地板上，因为地板被认为是*脏的区域。

  • 相反，如果需要存储物品，则应在货架上放置专用位置。

  • 存储的项目必须包含适当的cGMP标签，包括内容和有效期。

• 请勿将非无菌材料（包括活性药物成分（API）或原材料）引入洁净室。

• 推车通常是必不可少的，尤其是在转移环境监测设备时。

  • 使用推车时，必须确保对其进行适当的消毒，包括推车的车轮。手推车的轮子暴露在肮脏的环境中，如果未适当清洁，则会将微生物转移到洁净室中。

  • *佳做法是拥有专用推车。物料将在通道内从通用推车转移到专用的无尘室推车。

• 废物应尽快清除，并且不要与清洁物品接触。

  • 一条单独的专用废物通道是避免交叉污染的良好实践。

材料和人员转移的程序因公司而异，但是防止污染的总体目标保持不变。有多种方法可以将材料正确地转移到清洁区域。其中一些方法包括利用消毒剂喷洒或擦拭材料，使用多个袋子或将物品直接消毒到洁净室中。选择的方法将根据设备，材料与消毒剂的相容性以及所输送的材料而有所不同。

化学消毒的*个示例涉及使用经过验证的消毒剂来准备要运输到洁净室的物品。这可能包括用消毒剂喷洒或擦拭材料，以确保所有区域都暴露在消毒剂下。必须满足与消毒剂的*小湿接触时间。一些公司可能会执行一些程序，要求从物品上*干净的区域到物品上*脏的区域重叠冲程。

下一种方法是多袋法。在这种方法中，将材料包装到到达洁净室内芯所需的多个袋子（或包装材料）中，其中一个袋子对于A级区域保持完好无损。然后，将材料灭菌。在每个房间分类过渡中，将物品放入过渡直通中时，将单个外袋（或包裹）取出。在*后一次转换时，物品应装在至少一个袋子中。该方法的目的是取出可能受污染的外袋，并将其与任何微生物污染物一起留在较低的分类区域,这有助于防止污染物迁移到洁净室中。

讨论的第三种方法是通过灭菌法直接转移。这可能是*有效的方法，但是它需要使用双面消毒设备，例如双面高压灭菌器。将物料装入较低分类区域中的经过验证的循环模式。灭菌周期结束后，将物品从较高分类区域的箱体另一侧卸下。该方法可以包括高压灭菌器，汽化的过氧化氢，臭氧，干热炉，甚至洗衣机。